微生物科

 一、 痰标本的采集：清晨（未用餐前）先去除咽部分泌物，方法是发（呵）音去除，不是咳，必须彻底清除干净，然后刷牙漱口（如果患者带假牙的话，摘掉假牙漱口），最后用无菌盐水漱口6～7次，（以上目的是清除口腔和咽部正常菌群。）拆开痰盒外包装，咳取支气管深部痰口水，吐入无菌痰盒并盖好盖子，标本尽量减少带入唾液。
注意事项：要给患者解释明白，什么是上呼吸道和下呼吸道，（下呼吸道的解释，喉部以下。）留取的标本是下呼吸道标本，而不是上呼吸道标本（鼻咽部分泌物），留取下呼吸道痰标本前，必须彻底清除上呼吸道标本，因为大多数患者认为从口吐出的标本都叫痰。留取痰标本的关键就是，留取标本前彻底清除口腔和鼻咽部的分泌物。
留取时间：早上6点30分至上午10点。（从采集标本到送达微生物科，时间不能超过2个小时）
接收标本时间：早8点至上午10点30分。
送达地点：微生物科。
二、 尿液标本的采集：前提条件，留取尿液标本前12小时内未应用抗生素，确保留取尿液在膀胱内停留大于4小时以上，停留膀胱时间越长越好，小于4小时的标本会影响检测结果准确度。
 男性患者：男性需翻转包皮，用肥皂水清洗尿道口周围，然后用温水冲洗，保证不残留肥皂液为准，最后用无菌盐水冲洗尿道口周围，用无菌杯留取中段尿液l0ml左右送检，为避免正常菌群污染尿液，自然留取时，尿液需呈直线状排出。
女性患者：用肥皂水清洗外阴，特别是尿道口周围，然后用温水冲洗，保证不残留肥皂液为准，最后用手指将阴唇分开裸露尿道口，用无菌盐水从上至下冲洗尿道口，用无菌杯留取中段尿液10ml左右送检，为避免正常菌群污染尿液，自然留取时，尿液需呈直线状排出。
留置导管尿标本的采集：留取尿液前，必须更换新导尿管，有条件者可夹管4.5小时以上，使细菌有足够的时间繁殖，以提高阳性率。采样时应严格消毒尿道口处的导尿管壁，用无菌注射器针头斜穿管壁抽吸尿液，然后注入无菌杯子中送检：不可从集尿袋下端管口留取标本，不可打开导尿管和引流管连接处收集标本。因导尿管留取的标本容易污染，所以应尽量避免留置导尿管采集尿液标本做细菌培养。
 注意事项：要给患者解释明白，什么是中段尿（中段尿的解释就是尿液需呈直线状排出，弃去前段20-30厘米的尿液，然后再留取）。留取过程中不要让杯口接触皮肤，手不能触摸杯子和杯盖的内壁，留取尿液不要过多（半杯即可），盖子打开后放置平整桌面就可以，不要把瓶盖翻转放置。留取完标本后立即盖好盖子，杯子必须盖好，因为发现很多患者杯子没有盖严实。留取尿液标本的关键就是女性清洁好外阴，留取过程中必须避免阴道分泌物的混入，还有就是用无菌盐水冲洗完后，马上留取尿液标本，不能再走动到其他位置留取尿液标本。
送检时间：从采集标本到送达微生物科，时间不能超过2个小时
送达地点：微生物科。
三、穿刺液标本的采集：按照无菌操作规程消毒感染部位，用无菌针管穿刺采集感染部位体液，注入无菌试管立即送检。
注意事项：请不要用采集的针管送检，必须注入无菌试管送捡。
采集时间：从采集标本到送达检验科，时间不能超过1个小时。
送达地点：微生物科。
四、脓液和创伤分泌物标本的采集（开放性脓肿）：前期准备3个已浸润有无菌生理盐水的灭菌棉拭子，编好号码1、2、3号，用无菌生理盐水冲洗洗病灶表面后，用1号棉拭子采集病灶表面的脓液，用2号棉拭子采取脓液和病灶深部或基底部的分泌物，如果脓液够多的话，用3号棉拭子再次采集脓液和病灶深部或基底部的分泌物，立即送检。如果是填塞纱布的病灶，请准备剪刀和酒精灯，采集之前剪刀用火焰灭菌，拉出填塞纱布，剪取纱布最前端（大约0.5厘米）放置无菌杯中，然后按照前面用3个已浸润有无菌生理盐水棉拭子步骤再次采集。注意2号和3号棉拭子尽量采取化脓组织与正常组织交界处的脓汁。临床有时提出疑问，明明患者有感染的指征也有大量的炎性渗出，但为什么细菌培养常常阴性呢？这可能与标本采集的部位有关，如果单纯采集脓液是不行的，因为脓液经过我们涂片显微镜观察证实为脓细胞、细菌碎片及粘液组织的混合物，经常无完整的活的细菌形态，所以这样培养的结果常常无菌的。而交接处的活菌较多，会提高阳性率。
封闭性脓肿：方法同“穿刺液标本的采集”，即皮肤或黏膜表面局部消毒后，用注射器抽取，将脓液注入无菌试管内送检。
脓疱或水疱：先用碘伏消毒作用不少于60秒，然后75%酒精擦拭待干，用针头挑破脓疱，用无菌棉拭子采集脓疱液和基底部标本。
注意事项：封闭式脓肿请不要用采集的针管送检，必须注入无菌试管送检（无菌试管到检验科领取）。
采集时间：从采集标本到送达微生物科，时间不能超过30分钟 。 
送达地点：微生物科。
五、脑脊液标本的采集：应在用药前采集，由护理人员协助临床医生以无菌规程做腰椎穿刺，抽取脑脊液分别置于2个无菌体液培养瓶（需氧培养+厌氧培养，若抽取量过少可只做1瓶需氧培养）和1个无菌管（涂片检查）中，采集量1-2ml，若做常规和生化检验还需增加2个无菌管。  
注意事项：采集标本后应在15分钟内送检，注意保温。
采集时间：从采集标本到送达微生物科，时间不能超过15分钟。
送达地点：微生物科。
六、血液标本的采集：        
（一）  采集血培养样本的最佳时间：
 1、在患者接受抗生素治疗前采血。
 2、尽可能在患者寒战或开始发热时采血。
 3、如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养（解释：就是在24小时内没有应用抗生素）。
（二）  采集方法：
采集之前，先去掉血培养瓶的外盖，对露出的橡皮塞进行消毒并干燥，然后再进行穿刺部位的消毒。
皮肤消毒，成人可从肘静脉采血，新生儿可采脐带血或颈静脉血。血培养标本经常出现杂菌污染的情况，所以我们在采集标本时要规范消毒，严格执行皮肤消毒三步法：（1）75%酒精擦拭静脉穿刺部位30秒以上待干。（2）0.5%的碘伏或2%碘酊溶液擦拭作用不少于60秒，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3厘米以上。（3）75%酒精脱碘待干。对碘过敏的患者，用75%酒精消毒60秒，待酒精挥发干燥后采血。如果患者采血部位不够干净，应重复擦拭。洁净后的采血部位不能再次触摸。
（三） 采血步骤：持注射器按常规方法刺入静脉，采集适当血液（注：儿童瓶采集1～3ml，成人瓶采集8～10m1）注入血培养瓶，血液采集后要轻轻混匀，以防血液凝固。
注意事项：推荐血培养成人做双侧双套（即左右侧各一套需氧+厌氧培养），儿童可做一瓶（需氧），标本采集尽量不采集动脉血和下肢静脉血，建议采集时用两侧的上肢静脉。室外温度过低时，运送过程中注意保温。
（采集血培养的专用培养瓶，在采集之前到微生物领取。）
采集时间：从采集标本到送达微生物科，应立即送检。最长时间不能超过12小时。
接收标本时间：上班时间。
送达地点：上下午正常上班时间送达微生物科，夜间、中午和星期六、日下午放科室于室温。
以上为我院经常进行细菌培养项目的采集方法，如有不明白的地方请与微生物科联系：8046964。
备注：采集标本所用无菌杯和无菌拭子，请在采集前到微生物科领取，血培养瓶（无菌体液培养瓶）采集前到微生物科领取。本文描述的无菌盐水，就是静点用的NaCl注射液。